在前面提到，将等式同时取对数，并简化就可以得到： 或者这就是Henderson-Hasselbalch方程。值得注意的是，式子中酸及其共轭碱的浓度都是平衡时的浓度，除了酸性过于强的情况下，由于同离子效应的存在，一般都可用此式计算，根据此式可得出下列几点结论：1 缓冲液的pH值与该酸的电离平衡常数Ka及盐和酸的浓度有关。弱酸的pKa值衡定，但酸和盐的比例不同时，就会得到不同的pH值。酸和盐浓度相等时，溶液的pH值与PKa值相同。2 酸和盐浓度等比例增减时，溶液的pH值不变。3 酸和盐浓度相等时，缓冲液的缓冲效率为比较高，比例相差越大，缓冲效率越低，缓冲液的一般有效缓冲范围为pH=pKa±1,pOH=pKb±1。 [1]缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。江苏EBSS缓冲液常用知识
所有操作均应在通风橱中进行，与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。3.苯酚平衡：因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相，因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到，苯酚平衡操作方法如下：①液化苯酚应贮存于-20℃，此时的苯酚呈结晶状态。从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温，然后在68℃水浴中使苯酚充分融解。②加入羟基喹啉（8-Quinolinol）至终浓度。该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂，同时因其呈黄色，有助于方便识别有机相。③加入等体积的1MTris-HCl（)，使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。④重复操作步骤③。⑤加入等体积的MTris-HCl（)，使用磁力搅拌器搅拌15分钟，静置使其充分分层后，除去上层水相。⑥重复操作步骤⑤，稍微残留部分上层水相。⑦使用pH试纸确认有机相的pH值大于。⑧将苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。苯酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)配制方法：1.说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯酚/氯仿/异戊醇（25:24:1)。氯仿可使蛋白质变性并有助于液相与有机相的分离，而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。江苏EBSS缓冲液常用知识缓冲溶液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值，使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围。
该酶标IsC的工作浓度应为1／1?600。?????棋盘滴定法选择包被抗原工作浓度：①用包被液将抗原由1：50开始作比倍稀释后进行包被，洗涤。②将强阳性参考血清、弱阳性参考血清和阴性参考血清用稀释液作1：100稀释，加样，保温、洗涤。③加按工作浓度稀释的酶标IsC抗体，保温、洗涤。④加底物显色。加酸终止反应后读取A值。⑤选择强阳性参考血清的A值为0．8左右、阴性参考血清的A值小于0．1的包被抗的稀释度作为工作浓度，从中选取**适工作浓度。?1．2夹心法测抗原?????在夹心ELISA法中，可用棋盘滴定法同时选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度。①抗体免*球蛋白用包被缓冲液稀释至蛋白浓度为10．0、1．0和0．1微克／毫升，分别在ELISA板上进行包被，每一浓度包括3个纵行，洗涤。②在1个横行各包被孔中加入强阳性抗原液，另1横行加入弱阳性抗原液，第3横行加入阴性对照液，保温、洗涤。③将酶标抗体用稀释液稀释成3个浓度，例如1：1?000、1：5?000和1：25000。分别加入每个包被浓度的1个纵行中，保温、洗涤。④加底物显色。加酸终止反应后，读取A值。⑤以强阳性抗原的A值在0．8左右、阴性参考的A值小于0．1的条件作**适条件，据此选择包被抗体和酶抗体的工作浓度。
制备PBS缓冲液的方法制备PBS缓冲液非常简单，以下是制备1升10×PBS缓冲液的方法：13.将800ml的去离子水加入大容量烧杯中。14.将8g的氯化钠（NaCl）和0.2g的磷酸二氢钾（KH2PO4）加入烧杯中，用玻璃棒搅拌均匀。15.用去离子水将溶液补足至1升，继续搅拌至完全溶解。16.用盖子或保鲜膜覆盖烧杯，将烧杯放入冰箱中冷藏保存。注：若需要使用1×PBS缓冲液，只需取10×PBS缓冲液适量稀释即可。
制备PBS缓冲液的方法制备PBS缓冲液非常简单，以下是制备1升10×PBS缓冲液的方法：13.将800ml的去离子水加入大容量烧杯中。14.将8g的氯化钠（NaCl）和0.2g的磷酸二氢钾（KH2PO4）加入烧杯中，用玻璃棒搅拌均匀。15.用去离子水将溶液补足至1升，继续搅拌至完全溶解。16.用盖子或保鲜膜覆盖烧杯，将烧杯放入冰箱中冷藏保存。注：若需要使用1×PBS缓冲液，只需取10×PBS缓冲液适量稀释即可。 PBS缓冲液是一种常用的生物学缓冲液。
PBS溶液又称磷酸盐缓冲溶液，一般选择Na2HPO4和KH2PO4配制，因为钠盐溶解的较慢。根据不同pH的溶液，称量不同质量的磷酸盐，也可以用pH计调溶液的pH。PBS一般用作支持电解质。
配置方法播报编辑采用去离子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液，按以下步骤进行：(1) 配制1/15mol/L KH2PO4，即每升水中溶解9.078克KH2PO4；(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O，即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O；(3) 将18.2%（体积分数）KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合； 在生化研究工作中,常常要用到缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度.中国台湾DPBS缓冲液技术指导
一种溶液是否是缓冲溶液，可以通过在溶液中加入少量的酸或碱，观察pH值的变化来判断。江苏EBSS缓冲液常用知识
常用作缓冲溶液的酸类由弱酸及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。常见的缓冲体系有：1、弱酸和它的盐（如HAc---NaAc）2、弱碱和它的盐（NH3·H2O---NH4Cl）3、多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐（如NaH2PO4---Na2HPO4）的水溶液组成。而生化实验室常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tris（三羟甲基氨基甲烷）等系统，生化实验或研究工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，而是缓冲液中的某种离子。如硼酸盐、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。硼酸盐：硼酸盐与许多化合物形成复盐、如蔗糖。柠檬酸盐：柠檬酸盐离子容易与钙结合，所以存在有钙离子的情况下不能使用。磷酸盐：在有些实验，它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物，重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在。三羟甲基氨基甲烷：它可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起抑制作用。其主要缺点时温度效应。这点往往被忽视，在室温pH是，4℃时是，37℃时是，因此，4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时，其氢离子浓度就增加了10倍。在，其缓冲能力极为不理想。 江苏EBSS缓冲液常用知识
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